阪崎腸桿菌MMS基因檢測(cè)質(zhì)粒DNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

??【編號(hào)】：GBW(E)100305

??【產(chǎn)品名稱】：阪崎腸桿菌MMS基因檢測(cè)質(zhì)粒DNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

??【規(guī)格】：1.5mL；52.3 ng/μL(1.71×1010copies/μL)

??【用途】：

　　阪崎腸桿菌MMS基因檢測(cè)質(zhì)粒DNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

　　編號(hào): GBW(E)100305

　　規(guī)格: 1.5mL離心管

　　標(biāo)準(zhǔn)值：52.3 ng/μL(1.71×1010copies/μL)

　　不確定度:Urel=3.4%(k=2)

　　一、樣品制備

　　在GenBank中搜索阪崎腸桿菌的大分子合成操縱子（MMS）基因序列；對(duì)上述序列進(jìn)行分析，選擇合適的序列和合適的酶切位點(diǎn)，并將酶切位點(diǎn)加至序列兩端；將處理后的序列進(jìn)行全基因人工合成，并將所得全長(zhǎng)基因分別克隆至質(zhì)粒載體pUC19中，構(gòu)建獲得包含目的基因序列的質(zhì)粒DNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。利用大腸桿菌DH5α載體，復(fù)制生產(chǎn)，對(duì)目標(biāo)質(zhì)粒DNA進(jìn)行提取純化，經(jīng)稀釋分裝得到質(zhì)粒DNA樣品。

　　二、溯源性及定值方法

　　本標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中質(zhì)粒DNA采用紫外分光光度法和高分辨電感耦合等離子體質(zhì)譜法（HR-ICP-MS）進(jìn)行定值。

　　核酸分子含有嘌呤環(huán)和嘧啶環(huán)的共軛雙鍵，其紫外可見吸收光譜在260 nm附近有一強(qiáng)的吸收峰，針對(duì)雙鏈DNA，樣品濃度和吸光值之間有以下關(guān)系：雙鏈DNA樣品濃度= OD260×核酸稀釋倍數(shù)×50，其中OD260為核酸在260 nm處的吸光值。用超純水做空白對(duì)照，通過測(cè)定其在260 nm處的吸光值可換算出質(zhì)粒濃度。

　　核酸分子中，每個(gè)堿基對(duì)應(yīng)一個(gè)磷原子，根據(jù)公式：含磷量P%=堿基數(shù)*磷的原子量÷DNA分子量，即可計(jì)算出四個(gè)質(zhì)粒DNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的含磷量。再利用HR-ICP-MS方法檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)樣品中的磷元素含量，計(jì)算得到質(zhì)粒DNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的含量。

　　定值過程使用滿足計(jì)量學(xué)特性要求的測(cè)量方法和計(jì)量器具，保證其溯源性。

　　三、特性量值及不確定度

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)名稱	標(biāo)準(zhǔn)值	相對(duì)擴(kuò)展不確定度
標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)名稱	標(biāo)準(zhǔn)值	（k=2）
阪崎腸桿菌MMS基因檢測(cè)質(zhì)粒DNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)	[濃度]	3.40%

　　保質(zhì)期: 12個(gè)月

　　來(lái)源：計(jì)量院

　　類別：國(guó)標(biāo)物、阪崎腸桿菌MMS基因

　　聲明：此對(duì)照品、標(biāo)準(zhǔn)品由【中檢計(jì)量】提供網(wǎng)站查詢購(gòu)買服務(wù)

　　注：點(diǎn)擊cas，或者搜索：名稱、編號(hào)、cas均可顯示價(jià)格

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