BCR-ABL 融合基因檢測(cè)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品
National Standard for BCR-ABL
【類別】體外診斷試劑標(biāo)準(zhǔn)品
【批號(hào)】360071-202301
【性狀】白色凍干粉末
【用途】本標(biāo)準(zhǔn)品為首批研制。本標(biāo)準(zhǔn)品適用于 BCR-ABL1（p210）
檢測(cè)試劑盒的準(zhǔn)確度和檢出限性能評(píng)價(jià)，包括但不限于熒光 PCR 法、
熒光 RT-PCR 法、數(shù)字 PCR 法、逆轉(zhuǎn)錄數(shù)字 PCR 法等檢測(cè)方法（注：
其他方法學(xué)產(chǎn)品用戶需自行證明其適用性）。
【組成和規(guī)格】本標(biāo)準(zhǔn)品為 6 支/套，由人類紅白血病細(xì)胞系 K562 與
人原髓細(xì)胞白血病細(xì)胞 HL60 組成，包括 WS1、WS2、WS3、WS4、WS7
和 WS8。
【特性量值】本標(biāo)準(zhǔn)品可溯源至 WHO 第一代 BCR-ABL1 國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品
（NIBSC code: 09/138）。具體量值見下表：
標(biāo)準(zhǔn)品名稱 RNA 總量
BCR-ABL1 融合比例
（%IS）
支數(shù)
WS1 ~4 μg 14.0841 1 支
WS2 ~4 μg 1.2184 1 支
WS3 ~4 μg 0.1127 1 支
WS4 ~8 μg 0.0113 1 支
WS7 ~8 μg 0.0050 1 支
WS8 ~8 μg 0.0037 1 支
【使用方法和要求】
1、外觀檢查：本品密封包裝，使用前檢查包裝是否完好，有無破損
現(xiàn)象。檢查標(biāo)準(zhǔn)品成分是否齊全。標(biāo)準(zhǔn)品檢查：每支標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)為
白色凍干粉未。
2、使用前應(yīng)先從冰箱內(nèi)取出，直接加入 RNA 提取試劑中的裂解液，
如 Trizol 或其他溶液溶解凍干細(xì)胞。充分混勻后，按照提取試
劑說明書提取 RNA 后，進(jìn)行檢測(cè)分析。使用單位應(yīng)使用試劑盒的
轉(zhuǎn)換因子（CF），計(jì)算其%IS，作為最終的 BCR-ABL（p210）融合
比例測(cè)定值。
如果試劑盒無轉(zhuǎn)換因子，可使用本標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)以獲取轉(zhuǎn)換因
子 CF。具體方法如下：
取出本標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行 RNA 提取，檢測(cè)并記錄 RNA 的 濃度
（ng/μL）。將 RNA 分成兩管，一管用于當(dāng)天檢測(cè)，另一管于第二
天檢測(cè)。檢測(cè)時(shí)，每個(gè)樣本重復(fù)檢測(cè)三次，每個(gè)樣本有 6 個(gè)數(shù)據(jù)，
記錄 BCR-ABL1 融合基因以及 ABL1 內(nèi)參基因的拷貝數(shù)并計(jì)算融合
比例（BCR-ABL1/ABL1%）。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的平均檢測(cè)值濃度以及給定
的標(biāo)示濃度，進(jìn)行線性回歸分析，以獲取轉(zhuǎn)換因子 CF，具體計(jì)算
方式如下：以 Log 10（標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)示濃度%）為橫坐標(biāo)，以 Log10（標(biāo)
準(zhǔn)品平均檢測(cè)值濃度%）為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸分析，得到線性回
歸公式 y=ax+b 以及 R 2 值，在滿足斜率 a 的 95%置信區(qū)間在
[0.83,1.20]范圍內(nèi)，R 2
>0.97 的條件下，轉(zhuǎn)換因子 CF=10 -b 。
3、試劑盒性能應(yīng)滿足：
1）準(zhǔn)確度：試劑盒線性范圍內(nèi)的融合水平應(yīng)檢出，檢測(cè)值的絕對(duì)
偏差不超過±0.5 個(gè)對(duì)數(shù)數(shù)量級(jí)。
2）檢出限：0.01%融合基因（WS4）應(yīng)能檢出。
【包裝】1.5mL 凍存管
【貯藏】本品應(yīng)于-20℃條件下儲(chǔ)存，避免反復(fù)凍融。
【注意事項(xiàng)】
1、 本標(biāo)準(zhǔn)品均需要參與 RNA 提取。
2、 任何不合理的 RNA 處理、儲(chǔ)存可能導(dǎo)致結(jié)果的不準(zhǔn)確。
3、 產(chǎn)品使用過程中，注意防止受潮和污染。
本品雖不存在生物危險(xiǎn)性，仍應(yīng)按潛在的的傳染性樣品對(duì)待，操作注
意安全防護(hù)。