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		食用菌液體菌種技術(shù)（二）

　　搖瓶培養(yǎng)液體菌種技術(shù)這種方法用的設(shè)備主要是搖床分為往復(fù)式及旋轉(zhuǎn)式兩種,投資需幾千元。其技術(shù)要求較發(fā)酵罐要低一些,容易掌握,適合一般的制種單位和大型個(gè)體戶。整個(gè)生產(chǎn)流程包括培養(yǎng)基配制分裝→消毒→冷卻→接種→搖床培養(yǎng)→一級(jí)液體種→二級(jí)液體種→接固體培養(yǎng)基。培養(yǎng)液配制好后，裝入三角燒瓶中，裝量為三角燒瓶容量的1/5，并加入0～15粒小玻璃珠，滅菌過(guò)后接入一塊約2平方厘米的斜面菌種，再靜置培養(yǎng)48小時(shí)，再置往復(fù)式搖床上振蕩培養(yǎng)，振蕩頻率、振幅根據(jù)對(duì)象食用菌而定，一般為80～100次/分，6cm～10cm。如果用旋轉(zhuǎn)式搖床，振蕩頻率為200～220轉(zhuǎn)／分。搖床室溫控制在24℃～25℃，培養(yǎng)時(shí)間因菌類不同而異，一般是在7天左右。同樣培養(yǎng)過(guò)程中需要時(shí)刻監(jiān)測(cè)菌種的質(zhì)量。

　　菌種質(zhì)量監(jiān)測(cè)生產(chǎn)過(guò)程中發(fā)酵液的質(zhì)量檢測(cè)是必不可少的一項(xiàng)，菌液顏色和氣味是否正常是檢測(cè)發(fā)酵液質(zhì)量的重要標(biāo)準(zhǔn)。正常情況下，菌液初期略顯渾濁，隨著發(fā)酵的進(jìn)行逐漸變?yōu)榍宄海侯伾絹?lái)越淡；若有污染發(fā)生，菌液始終處于混濁狀態(tài)，菌球與菌液的界限不明顯，且發(fā)酵液顏色有異常變化。培養(yǎng)初期，菌液有培養(yǎng)基的香味，隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)會(huì)越來(lái)越淡，后期呈菌絲的氣味；若染菌或菌種質(zhì)量不好，會(huì)有酸、臭、酒味或其他異常的氣味。因而在菌種培養(yǎng)過(guò)程中，工作人員要經(jīng)常聞一聞排氣口排出的氣味是否有異常。

　　發(fā)酵終點(diǎn)的判定這直接關(guān)系到生產(chǎn)的液體菌種的數(shù)量和質(zhì)量，發(fā)酵時(shí)間過(guò)短不僅會(huì)造成資源浪費(fèi)菌種發(fā)酵也未達(dá)到最佳狀態(tài)，發(fā)酵時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，營(yíng)養(yǎng)消耗過(guò)度，會(huì)使菌體活力下降，甚至菌絲發(fā)生自溶。可以通過(guò)菌球形態(tài)、密度及菌液顏色、氣味等指標(biāo)進(jìn)行初步判斷。食用菌進(jìn)行分批培養(yǎng)時(shí)遵循微生物生長(zhǎng)曲線規(guī)律，即有延滯期、對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期、穩(wěn)定期、衰亡期，其中對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的菌絲體生活力最旺盛，是放罐接種的最佳時(shí)期。實(shí)踐表明，培養(yǎng)72h形成活力最盛的菌球，直徑約0.3cm，菌球濃度約80%～85%[1]3.液體菌種固化技術(shù)液體菌種較固體菌種有諸多優(yōu)點(diǎn)，為食用菌生產(chǎn)的規(guī)模化指明了方向，但是液體菌種儲(chǔ)存時(shí)間短，不易保存的特性，這一特性提高了液體菌種的生產(chǎn)成本，制約了液體菌種的進(jìn)一步的推廣應(yīng)用。近年來(lái)有研究者提出將液體菌種同固體基質(zhì)進(jìn)行混合，形成固化菌種從而提高液體菌種的保存時(shí)間。食用菌液體菌種固化技術(shù)，可有效解決液體菌種的上述缺點(diǎn)。在優(yōu)選的蔗糖、豆餅粉液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)香菇856，將得到的菌絲球與優(yōu)選的

　　主要成分是棉籽殼的固化載體基質(zhì)按l：6的比例混合，制成固化菌種，室溫保藏30d，與保藏0d的固化菌種相比，呼吸強(qiáng)度低，纖維素酶活力明顯升高，萌發(fā)力強(qiáng)，菌絲生長(zhǎng)快。[5]另外還有研究者對(duì)固化菌種的生產(chǎn)成本進(jìn)行了估算，按照本試驗(yàn)中的菌種固化方法及模擬的生產(chǎn)規(guī)模，計(jì)算出的平菇固化菌種生產(chǎn)成本為0.755元/千克，每千克比平菇常規(guī)菌種的生產(chǎn)成本0.9元低0.145元，減低比例達(dá)19.2％，具有明顯的經(jīng)濟(jì)效益

　　液體菌種生產(chǎn)技術(shù)新走向——還原型液體菌種，還原型液體菌種不同于通常的發(fā)酵液體菌種，它是將利用尖端生物工程技術(shù)生產(chǎn)的菌絲塊進(jìn)行粉碎、稀釋后做成的菌種。有實(shí)驗(yàn)證實(shí)這種菌種200克的菌絲塊可以接種5萬(wàn)瓶，生產(chǎn)2噸食用菌，眾所周知食用菌生產(chǎn)過(guò)程中要使用大量菌種，生產(chǎn)環(huán)節(jié)中成本最高的就是菌種，還原型液體菌種技術(shù)能夠使用極少量的菌種生產(chǎn)大量食用菌極大的降低了生產(chǎn)成本，無(wú)疑是技術(shù)上的革新，可能成為將來(lái)食用菌生產(chǎn)技術(shù)新的發(fā)展方向。還原型液體菌種還有諸多優(yōu)點(diǎn)：比如說(shuō)可以任意選擇菌絲濃度、培養(yǎng)與生育時(shí)間縮短。以金針菇為例，利用固體木屑種生長(zhǎng)周期為55天，利用發(fā)酵液體菌種為48天．而利用還原型液體菌種為42天。初期投資成本低，只需要接種機(jī)、接種罐、菌絲塊攪拌機(jī)及簡(jiǎn)易無(wú)菌箱。由于不需要液體發(fā)酵罐進(jìn)行深層培養(yǎng)，即可以有效控制菌種來(lái)源的污染，解決了使用液體菌種污染率高的問(wèn)題，綜上優(yōu)點(diǎn)還原型液體菌種具有很高的推廣價(jià)值。[6]5.液體菌種新的層面上的應(yīng)用

　　液體菌種的應(yīng)用早就跳出了只用于生產(chǎn)食用菌子實(shí)體的層面，在新世紀(jì)里早就得到了更高層面的應(yīng)用。從食用菌液體菌種發(fā)酵產(chǎn)物中可提取出多種生理活性物質(zhì)，如多糖、酚類、萜類化合物、多肽、生物堿、維生素、核酸、酶、氨基酸、甾醇、具抗生素作用的化合物以及植物激素等，液體菌種中提取的真菌多糖也是廣泛銷售的保健品；食用菌菌種在液體培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生多種生理活性物質(zhì)具有抗癌、抗病菌、抗病毒、抗衰老、消除炎癥、提高機(jī)體免疫力等醫(yī)療保健功效，某些利用液體培養(yǎng)菌絲體制造的食用菌藥物已經(jīng)上市如靈芝菌片、蜜環(huán)片、寧心寶膠囊等；以食用菌為原料，利用其他一些農(nóng)副產(chǎn)品進(jìn)行食用菌液體菌種培養(yǎng)生產(chǎn)的菌絲體飲料或加強(qiáng)型飲料，據(jù)報(bào)道這種飲料味道鮮美，營(yíng)養(yǎng)豐富；利用食用菌的菌絲體含有高蛋白的特點(diǎn)用來(lái)生產(chǎn)綠色食品添加劑。利用液體菌種培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)食用菌營(yíng)養(yǎng)品、保健品、藥品或其他生物制品將是食用菌產(chǎn)業(yè)開(kāi)發(fā)的新領(lǐng)域，有著十分廣闊的發(fā)展前景。
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　　食用菌液體菌種生產(chǎn)技術(shù)的詳細(xì)方法（一）

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