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| 基質(zhì)上的配體離開基質(zhì)的骨架向外擴展 | |||
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生成N羥基琥珀酰亞胺酯、環(huán)氧基等活性基團直接與各種配體偶聯(lián)。引入間隔臂的基質(zhì)與配體結(jié)合時，另外也可以通過進一步的活化處置。配體就可以離開基質(zhì)一定的空間，從而可以減少空間位阻效應(yīng)，易于與待分離物質(zhì)結(jié)合。
由于配體結(jié)合在基質(zhì)上，親和層析中。與待分離的生物大分子結(jié)合時，很大水平上要受到基質(zhì)和待分離的生物大分子間的空間位阻效應(yīng)的影響。尤其是當配體較小或待分離的生物大分子較大時，由于直接結(jié)合在基質(zhì)上的小分子配體非常靠近基質(zhì)，而待分離的生物大分子由于受到基質(zhì)的空間障礙，使得其與配體結(jié)合的部位無法接近配體，影響了待分離的生物大分子與配體的結(jié)合，造成吸附量的降低。解決這一問題的方法通常是配體和基質(zhì)之間引入適當長度的間隔臂”即加入一段有機分子，使基質(zhì)上的配體離開基質(zhì)的骨架向外擴展伸長，這樣就可以減少空間位阻效應(yīng)，大大增加配體對待分離的生物大分子的吸附效率。加入手臂的長度要恰當，太短則效果不明顯；太長則容易造成彎曲，反而降低吸附效率。
R通常是氨基或羧基，n一般為212例如Pharmacia公司生產(chǎn)的AHSepharos4B和CHSepharos4B就是分別將1,引入間隔臂分子常用的方法是將適當長度的氨基化合物NH2CH2nR共價結(jié)合到活化的基質(zhì)上。6乙二胺，6氨基乙酸與CNBr活化的瓊脂糖反應(yīng)引入間隔臂分子。二者的末端分別為氨基或羧基，通過碳二亞胺的縮合作用可以分別與含羧基或氨基的配體偶聯(lián)。
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