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		恢復(fù)培養(yǎng)冷凍干燥保藏菌種的轉(zhuǎn)接技術(shù)

　　冷凍干燥保藏轉(zhuǎn)接技術(shù)

　　建議用下列方法恢復(fù)培養(yǎng)冷凍干燥保藏的菌種。

　　1、安瓶管開(kāi)封

　　用浸過(guò)70％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管。

　　用火焰將安瓿管頂端加熱。

　　滴無(wú)菌水至加熱的安瓿管頂端使玻璃開(kāi)裂。

　　用挫刀或鑷子敲下已開(kāi)裂的安瓿管的頂端。

　　2、菌株恢復(fù)培養(yǎng)

　　用無(wú)菌吸管，吸取0.3-0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基,滴人安瓿管內(nèi),輕輕振蕩,使凍于菌體溶解呈懸浮狀

　　取0.1-0.2ml菌體懸浮液，移植于適宜的瓊脂斜面/平板培養(yǎng)基上，剩余的菌液，注入適宜的液體培養(yǎng)基內(nèi)，然后在建議的溫度下培養(yǎng)。

　　3、注意事項(xiàng)

　　菌種活化前，請(qǐng)將安瓿管保存在6一10℃的環(huán)境下。

　　厭氧菌的培養(yǎng)，如無(wú)特別說(shuō)明，自開(kāi)封至接種完成，均需以無(wú)氧氣體充填，以保持厭氧狀態(tài)。

　　某些菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥保存后,延遲期較長(zhǎng),需連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng),此時(shí)請(qǐng)將步驟二重復(fù) 一次。

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