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		成品預(yù)裝培養(yǎng)基平皿在潔凈環(huán)境中的使用

　　成品預(yù)裝培養(yǎng)基平皿是用于獲得微生物純培養(yǎng)的最常用的固體培養(yǎng)基，它是冷卻凝固后的固體培養(yǎng)基在無菌培養(yǎng)皿中形成的平面。培養(yǎng)基平皿常用于單孢分離、測定菌絲生長速度、觀察菌落的形態(tài)、拮抗實(shí)驗(yàn)、測定潔凈空間及表面的污染水平。

　　潔凈區(qū)沉降菌的監(jiān)測依據(jù)《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）沉降菌的測試方法》現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行；浮游菌的監(jiān)測依據(jù)《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）浮游菌的測試方法》現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。下文著重介紹平板在潔凈環(huán)境中的使用。

　　培養(yǎng)基平皿進(jìn)出潔凈區(qū)

　　1將從倉庫領(lǐng)入的預(yù)裝培養(yǎng)基平皿在脫外包間脫去外包，若是真空包裝，需仔細(xì)檢查包裝是否漲袋，若漲袋請勿傳進(jìn)潔凈區(qū)使用；

　　2用消毒劑消毒外表面，放入傳遞窗或傳入物流緩沖間，接著紫外燈照射10~15min或根據(jù)公司文件規(guī)定操作；

　　3消毒完后，從潔凈區(qū)（D級或C級區(qū)）一側(cè)小心拿出培養(yǎng)基平皿；

　　4如果需要在B級區(qū)使用，再脫一層包裝傳入B級區(qū)；

　　5如果需要在A級區(qū)使用，再脫一層包裝傳入A級區(qū)；

　　6收集取樣后的培養(yǎng)基平皿，做好取樣信息標(biāo)記，傳出潔凈區(qū)，及時放進(jìn)培養(yǎng)箱培養(yǎng)，保證檢測結(jié)果準(zhǔn)確；

　　7打開包裝后未使用的培養(yǎng)基平皿用備用呼吸袋（一般培養(yǎng)皿廠家提供）包裝好，做好標(biāo)識，存放在潔凈區(qū)，下次取樣可以使用。

　　從平板進(jìn)入潔凈區(qū)的流程可以看出，實(shí)驗(yàn)室自制培養(yǎng)皿如果沒有特別的保護(hù)，不能用于潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)控。這也是2015版《中國藥典》的要求：用于環(huán)境監(jiān)控的培養(yǎng)基須特別防護(hù)，最好要雙層包裝和終端滅菌，如果不能采用終端滅菌的培養(yǎng)基，那么在使用前應(yīng)進(jìn)行100%的預(yù)培養(yǎng)，以防止外來的污染物帶到環(huán)境中及避免出現(xiàn)假陽性結(jié)果。

　　2最少采樣點(diǎn)數(shù)目：浮游菌測試和沉降菌監(jiān)測最少采樣點(diǎn)數(shù)目可參考GB/T16292-2010 如下表：
培養(yǎng)基平皿

　　浮游菌測試和沉降菌監(jiān)測最少采樣點(diǎn)數(shù)目圖

　　用于浮游菌采樣

　　3.1培養(yǎng)皿在浮游菌采樣中的使用

　　3.2浮游菌采樣注意事項(xiàng)

　　一般采用?90mm規(guī)格的培養(yǎng)基平皿，可根據(jù)所選用的采樣器選擇合適培養(yǎng)基平皿；

　　培養(yǎng)基需為TSA或SDA或其他用戶認(rèn)可并經(jīng)過驗(yàn)證；

　　培養(yǎng)基平皿在使用前應(yīng)仔細(xì)檢查每一個皿的質(zhì)量，有變質(zhì)、污染或破損的平皿不得使用；

　　在采樣過程中，不要將任何物體（包括操作人員的手和頭）置于板皿上方，避免在取樣點(diǎn)附近活動。

　　用于沉降菌監(jiān)測

　　4.1采樣點(diǎn)布置

　　參考GB/T16294-2010附錄A潔凈區(qū)采樣點(diǎn)布置。

　　4.2最少培養(yǎng)基平皿數(shù)參考GB/T16294-2010

　　4.3注意事項(xiàng)

　　使用前必須檢查平板，若平板包裝破損或超過有效期不得使用。

　　取樣后必須盡快培養(yǎng)，以保證結(jié)果準(zhǔn)確。

　　用于表面微生物測定

　　表面微生物測定是對環(huán)境、設(shè)備和人員的表面微生物進(jìn)行監(jiān)測，方法是檢測人員打開平皿后，用培養(yǎng)基表面輕輕接觸取樣點(diǎn)表面，注意不要旋轉(zhuǎn)，取樣完畢后立即蓋上平皿蓋，完全接觸過程大約5s，取樣結(jié)束后用消毒劑消毒取樣點(diǎn)或用消毒劑浸濕的無菌潔凈布擦拭取樣點(diǎn)。
培養(yǎng)基平皿

　　表面微生物測定圖

　　以上所用樣品及其培養(yǎng)廢棄物應(yīng)視為污染性的物質(zhì)，應(yīng)蒸汽滅菌后處理或委托有資質(zhì)的第三方處理。

　　目前國內(nèi)各制藥企業(yè)環(huán)境監(jiān)測中微生物的監(jiān)測方法大多依據(jù)GB/T16293-2010醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）浮游菌的測試方法和GB/T16294-2010醫(yī)藥工業(yè)潔凈室(區(qū))沉降菌的測試方法進(jìn)行。潔凈區(qū)環(huán)境浮游菌、沉降菌及表面微生物監(jiān)測用培養(yǎng)基一般采用胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基（TSA），當(dāng)監(jiān)測結(jié)果有疑似真菌或考慮季節(jié)因素影響時，可增加沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（SDA），但是對于抗生素企業(yè)和部分制劑廠家來說，僅僅按照這兩個國標(biāo)推薦的兩種培養(yǎng)基（TSA和SDA）來監(jiān)測潔凈區(qū)的微生物是不夠全面的，必要時可以加入適宜的中和劑。

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